目錄號：E373-YH01-01A

產品描述:

CRISPR/Cas是細菌和古細菌在長期演化過程中形成的一種適應性免疫防御系統。CRISPR相關蛋白Cas9已經廣泛應用于基因組編輯，相比于Cas9蛋白，Cas12a具有類似的基因組編輯效率，但具有較低的脫靶效率，在基因治療應用中具有巨大的潛力。

不同于Cas9蛋白，Cas12a不需要tracrRNA，只需要單個由41-44nt核苷酸組成的crRNA引導。這非常有利于基因組編輯，因為Cas12a不僅比Cas9小，而且還具有較小的crRNA分子（接近Cas9的總sgRNA的一半）。與Cas9需要富含G的PAM相反，Cas12a-crRNA復合物通過識別富含T（5'-TTTN-3'）的PAM基序來切割靶DNA。Cas12a執行剪切后的DNA雙鏈斷裂引入了4或5個核苷酸突出的粘性末端。這促使Cas12a可以作為一種新型的基因檢測和成像的工具。

本制品在蛋白兩端分別加了核定位信號（NLS），當Cas12a以NLS序列表達時，Cas12a-RNP復合體可以在進入細胞后立即定位到細胞核。無需體內轉錄或翻譯，提高了該方法在質粒系統上的效率。

產品特點：

1) 純蛋白體系，避免CRISPR基因敲除時引入質粒或病毒干擾；

2) 可顯著降低脫靶效應。

產品用途：

1) 基于蛋白與sgRNA轉染的非病毒載體CRISPR基因敲除；

2) 基于蛋白與sgRNA轉染的非病毒載體CRISPR基因敲入；

3) sgRNA 剪切靶點DNA 效率檢測，降低體內篩選成本；

4) 體外剪切靶DNA的特異位點。

保存溫度：

-20℃保存，或-80℃長期保存。

應用實例：

圖例）Cas12a Nuclease 做DNA 片段體外切割活性檢測。

帶有靶位點的DNA 片段約為2000bp，酶切后的片段為1600bp 和400bp。

          For research use only.