非洲豬瘟(African swine fever,ASF)是由非洲豬瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病,給養豬業造成了嚴重的經濟損失.本研究利用重組酶聚合酶擴增技術(RPA),針對ASFV B646L(p72)基因設計了3組引物和探針,并進行篩選、反應條件優化、靈敏性、特異性和重復性試驗,建立了實時熒光RPA方法.結果顯示,該方法在39℃、20 min內即可檢測10個拷貝的DNA分子,且與豬瘟病毒、豬圓環病毒2型、豬細小病毒、豬偽狂犬病病毒均無交叉反應,檢測5.5×106至5.5×100拷貝/μL共7個稀釋度樣品在各時間點的熒光強度,變異系數范圍在0.38％～28.30％.該等溫、快速擴增方法可用于ASFV的定性檢測,為中國ASFV感染的早期診斷提供技術支持,對疫情暴發后相應控制方案的制定具有重要意義.

一種簡便高準確率的檢測技術

 2014年6月9 訊 /生物谷BIOON/ --近日，刊登在國際雜志Analytical Chemistry上的一篇研究報告中，來自美國萊斯大學的科學家通過研究開發了一種簡便高準確率的檢測技術，來檢測患者機體中的HIV跡象及病情發展程度。

研究者Rebecca Richards-Kortum表示，當前用于診斷嬰兒HIV狀況的金標準就是依賴實驗室設備及當前可用的檢測技術來對其機體中的病毒載量進行監測，而本文中研究者則開發出了基于核酸的新型HIV檢測技術。

      這項新型的檢測技術基于PCR的方法對重組聚合酶進行放大（RPA），從而取代了復雜的實驗室檢測步驟，其可以對血液中的遺傳標記物進行快速多重放大，從而使得病毒的遺傳標記物可以很容易被檢測到；利用qRPA檢測就可以對HIV DNA中的特殊序列進行熒光探針的靶向標記，從而使用機器進行定量檢測，最后通過對熒光DNA進行軟件分析就可以使得醫生們掌握HIV在患者機體中的動態信息。

用HIV序列的相同引物進行擴增

Rohrman教授說道，我們可以通過放大內部陽性對照對測試進行校準，而且可以利用HIV序列的相同引物進行擴增，因此檢測實驗可以正常進行；這項新型技術可以幫助追蹤老年患者機體中的病毒載量，這對于臨床醫生們實時監測病人體內的HIV情況，從而來確定患者是否需要及時治療提供了一定的參考數據。

      從臨床角度來講，基于DNA的HIV檢測可以在四個數量級上對HIV的病毒載量進行定量檢測，盡管當前研究者使用熱循環儀來進行檢測，但是研究者正在著力開發一種新型的檢測技術，使得整個操作步驟維持在室溫和體溫之間，從而確保實驗的通用性和準確性。

RPA現貨清單

RPA恒溫擴增技術發表的論文

1. https://www.nature.com/articles/s41598-018-35636-5 

Development of real-time reverse transcription recombinase polymerase amplification (RPA) for rapid detection of peste des petits ruminants virus in clinical samples and its comparison with real-time PCR test 實時反轉錄重組酶聚合酶擴增技術（RPA）的研究進展

2. https://brill.com/view/journals/nemy/21/3/article-p243_2.xml

Recombinase polymerase amplification assay for rapid detection of the root-knot nematode Meloidogyne enterolobii重組酶聚合酶擴增法（RPA）快速檢測

3. http://www.chvm.net/EN/abstract/abstract7141.shtml

?? 2017, Vol. 44 ?? Issue (11): 3270-3277.doi: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.11.023

Establishment of a Real-time Fluorescent Recombinase Polymerase Amplification (RPA) for the Detection of African Swine Fever Virus非洲豬瘟病毒實時熒光重組酶聚合酶擴增技術(RPA)檢測方法的建立

HADENG Chu-riya^1,2, FAN Xiao-xu¹, ZHAO Yong-gang¹, WANG Shu-juan¹, ZHANG Zhi-cheng¹, GE Sheng-qiang¹, LI Lin¹, WU Xiao-dong¹, WANG Zhi-liang¹   

1. National Research Center for Exotic Animal Disease, China Animal Health and Epidemiology Center, Qingdao 266032, China;2. College of Veterinary Medicine, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China

4.https://journals.plos.org/plosone/articleid=10.1371/journal.pone.0166903

Recombinase Polymerase Amplification Assay—A Simple, Fast and Cost-Effective Alternative to Real Time PCR for Specific Detection of Feline Herpesvirus-1 重組酶聚合酶擴增法（RPA）-一種簡便、快速、經濟的貓皰疹病毒-1特異性檢測方法

· Jianchang Wang,

· Libing Liu,

· Jinfeng Wang,

· Xiaoxia Sun,

Wanzhe Yuan  

5. https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/ac5011298

Quantification of HIV-1 DNA Using Real-Time Recombinase Polymerase Amplification 監測HIV的新型移動DNA檢測技術（RPA技術）

默瑞生物

      默瑞(上海)生物科技有限公司，作為專業的生命科學產品推廣與服務商，以“創新，專業，共贏”的理念，不斷強化服務體系，提升客戶體驗，以莫納生物產品為主線，結合國內外優質產品提供高標準完整解決方案，幫助科研客戶和生物技術企業高效創新，加速轉化，創造更多優質產品，提升社會福祉，實現多方共贏。

　　默瑞生物創立以來，已經陸續導入TwistDx，enzymatics，KAPA BIOSYSTEMS，BioDynami，Jackson，Echelon，ChromoTek，Nanocs，Biotechrabbit，Lee Biosolutions, magtivio等優質國際品牌，逐步培育成為專業用戶的首選。