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突破光學(xué)顯微鏡的極限
很長一段時(shí)間里,科學(xué)家認(rèn)為光學(xué)顯微鏡有一個(gè)極限:光學(xué)顯微鏡無法獲得比半光波長更好的分辨率。在熒光分子的幫助下,2014年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)的幾位獲得者巧妙的繞開了這種極限。他們突破性的研究將光學(xué)顯微鏡帶入了納米維度。
在納米顯微鏡下,科學(xué)家實(shí)現(xiàn)了活體細(xì)胞中單個(gè)分子通路的可視化。他們能夠觀察到分子是如何在大腦神經(jīng)細(xì)胞之間生成神經(jīng)突觸;他們可以追蹤帕金森病、阿爾茲海默癥和亨廷頓癥患者體內(nèi)相關(guān)蛋白的累積情況;他們還能跟蹤受精卵在分裂形成胚胎時(shí)蛋白質(zhì)的變化過程。
這次獲獎(jiǎng)的是兩項(xiàng)獨(dú)立的技術(shù)。第一項(xiàng)是Stefan Hell于2000年研制的受激發(fā)射減損(STED)顯微技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)采用了兩束激光;一束負(fù)責(zé)激發(fā)熒光分子使其發(fā)光,另一束則負(fù)責(zé)抵消大部分熒光,只留下一塊納米大小體積的熒光區(qū)域。用該技術(shù)仔細(xì)掃描樣本,得出的圖像分辨率打破了Abbe提出的顯微分辨率極限。
Eric Betzig和William Moerner分別獨(dú)立地進(jìn)行研究,為第二種技術(shù)打下了基礎(chǔ),即單分子顯微技術(shù)。這種方法依賴于開關(guān)單個(gè)分子熒光的可能性。科學(xué)家對同一區(qū)域進(jìn)行了多次“繪圖”,每次僅僅讓很少量的分散分子發(fā)光。將這些圖像疊加起來產(chǎn)生了密集的納米尺寸超分辨率圖像。2006年,Eric Betzig首次采用了這一技術(shù)。
顯微技術(shù)進(jìn)入了納米時(shí)代,熒光染料也要與時(shí)俱進(jìn),開創(chuàng)新時(shí)代!
德國ChromoTek公司主要致力于細(xì)胞生物學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)的研發(fā)與研究。產(chǎn)品包括單克隆抗體、重組單域抗體、熒光抗體、GFP或RFP連接蛋白等。ChromoTek公司以“為全球研究學(xué)者開發(fā)并商業(yè)化更好的工具”作為使命,目標(biāo)成為蛋白質(zhì)組學(xué)和活細(xì)胞成像領(lǐng)域公認(rèn)的領(lǐng)導(dǎo)品牌。其中,Nano-Boosters和Chromobodies?系列產(chǎn)品以其優(yōu)異性能,更能適用于超分辨率顯微鏡!
他們的秘密武器就是納米抗體(nanobody)。這些來源于駱駝科動(dòng)物的單結(jié)構(gòu)域肽段與抗體相似,都有著與抗原結(jié)合的性質(zhì),不過它們的穩(wěn)定性更好,體積更小,親和力更高。
1. Nano-Boosters
Nano-Boosters是由羊駝單域抗體片段(Nanobody)與熒光染料基團(tuán)共價(jià)偶聯(lián)而成。在超分辨率顯微鏡中定位更準(zhǔn)確,小于2nm抗原表面標(biāo)簽位移,離真實(shí)目的基因更近,指哪是哪!
Nano-Boosters與目的蛋白結(jié)合后,熒光強(qiáng)度成倍增長!再也不用擔(dān)心熒光不夠亮,拍出一堆無法處理的廢片了。
熒光圖像分辨率更高,更清晰!無論是普通熒光顯微鏡,抑或是最新的超分辨率顯微鏡,Nano-Boosters都能有優(yōu)異的表現(xiàn)。讓你能清清楚楚看細(xì)胞,明明白白做實(shí)驗(yàn)。
Nano-Boosters適用范圍廣泛:
適用實(shí)驗(yàn) | 材料 | 應(yīng)用 |
傳統(tǒng)免疫熒光 (IF) 免疫組化 (IHC) 免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC) FISH、EdU-Click-ITTM 后信號恢復(fù) | 細(xì)胞系 組織切片 果蠅胚胎 | 寬場熒光顯微鏡 激光共聚焦顯微鏡 超分辨率顯微鏡 (如:3D-SIM, PALM, STED, STORM) |
2. Chromobodies?
Chromobodies?是羊駝單域抗體片段(Nanobody)與熒光蛋白融合而成的質(zhì)粒。這種創(chuàng)新的熒光納米探針可以對活細(xì)胞內(nèi)源性蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、功能、分布及動(dòng)態(tài)過程進(jìn)行實(shí)時(shí)分析和可視化。(動(dòng)態(tài)圖)
該產(chǎn)品具有特性:
· 易轉(zhuǎn)染入各類細(xì)胞、無創(chuàng)性
· 無過度表達(dá)、無細(xì)胞毒性
· 不影響細(xì)胞存活或遷移能力。
· 實(shí)時(shí)可視化
· 熒光維持時(shí)間久